Enzymy i techniki analizy DNA
Oprócz enzymów restrykcyjnych, kluczowymi narzędziami są ligazy i polimerazy DNA. Ligazy działają jak biologiczny "klej" - łączą fragmenty DNA tworząc wiązania fosfodiestrowe między nukleotydami. Polimerazy DNA natomiast służą do powielania fragmentów DNA, tworząc nową nić komplementarną do matrycy.
W laboratoriach powszechnie stosuje się technikę analizy restrykcyjnej, która polega na trawieniu DNA wybranymi enzymami restrykcyjnymi, a następnie porównywaniu liczby i długości powstałych fragmentów. Do rozdzielenia tych fragmentów wykorzystuje się elektroforezę DNA - technikę, w której ujemnie naładowane cząsteczki DNA przemieszczają się w żelu pod wpływem pola elektrycznego w kierunku elektrody dodatniej. Krótsze fragmenty poruszają się szybciej, co pozwala na ich rozdzielenie.
Inną ważną techniką jest hybrydyzacja DNA z użyciem sondy molekularnej. Sonda to krótki, oznakowany odcinek kwasu nukleinowego, który łączy się z poszukiwaną sekwencją DNA na zasadzie komplementarności, co pozwala na wykrycie konkretnych sekwencji w badanym materiale genetycznym.
🔬 Ciekawostka: Podczas elektroforezy DNA, fragmenty DNA rozdzielają się według długości, tworząc charakterystyczny wzór prążków, który można porównać do swoistego "kodu kreskowego" danego organizmu!