Techniki inżynierii genetycznej
Podstawowe techniki inżynierii genetycznej obejmują analizę restrykcyjną, elektroforezę DNA, hybrydyzację DNA oraz reakcję łańcuchową polimerazy (PCR).
Analiza restrykcyjna i elektroforeza DNA to techniki często stosowane łącznie. Analiza restrykcyjna polega na trawieniu DNA wybranymi enzymami restrykcyjnymi, a następnie porównaniu liczby i długości powstałych fragmentów. Elektroforeza DNA to metoda rozdzielania fragmentów DNA w porowatym żelu pod wpływem pola elektrycznego. Krótsze cząsteczki DNA przemieszczają się szybciej w żelu.
Definition: Elektroforeza DNA - technika rozdzielania fragmentów DNA w żelu agarozowym pod wpływem pola elektrycznego, wykorzystywana do analizy wielkości i ilości fragmentów DNA.
Hybrydyzacja DNA z użyciem sondy molekularnej polega na łączeniu komplementarnych nici kwasów nukleinowych. Ta technika jest wykorzystywana do wykrywania specyficznych sekwencji DNA.
Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) to metoda powielania wybranego odcinka DNA za pomocą termostabilnej polimerazy DNA, bez udziału żywych komórek. PCR składa się z trzech głównych etapów: denaturacji DNA (95°C), hybrydyzacji starterów (40-60°C) i syntezy komplementarnych nici DNA (70°C).
Highlight: PCR jest niezwykle wydajną techniką - liczba kopii DNA wzrasta wykładniczo z każdym cyklem (2^n, gdzie n to liczba cykli).
Zalety PCR obejmują szybkość, niski koszt i możliwość pracy z małą ilością DNA. Jednakże, technika ta ma również pewne ograniczenia, takie jak ryzyko zanieczyszczenia próbki i ograniczona długość powielanych fragmentów.
